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PNAS三个氨基酸突变就能把Karrik

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本研究揭示了小分子激素受体进化的基础对于全面了解蛋白质如何结构驱动功能。在植物中,独脚金内酯的激素受体非常适合进化研究,因为密切相关的同源物具有不同的配体偏好。更重要的是,由于简单的植物转基因系统,受体可以互换并在体内快速进行功能评估。文章表明只需要三个突变即可将非独脚金内酯基受体KAI2转变为识别植物激素独脚金内酯的受体。这种经过修饰的受体仍然保留其感知KAI2配体的天然功能。我们的定向进化研究表明,增加KAI2的受体混杂只需要几个关键突变,这可能对寄生植物中独脚金内酯受体的进化产生影响。

研究内容

1、鉴定参与SL结合的氨基酸。八个ShHTL7残基(Tyr26、Leu、Thr、Leu、Thr、Tyr、Thr和Cys识别并替换到等效的同源位置在KAI2中的所有单、双和三组合中生成92种嵌合KAI2基因变体。

2、作者继续探究生成的92种嵌合KAI2基因变体对SL反应。研究发现ShHTL7氨基酸参与将KAI2转化为SL受体的重要氨基酸。

3、通过对以上嵌合体转基因拟南芥发现Var64(TrpLeu、PheThr和GlyThr)突变体对GR24具有敏感性,进一步研究发现Var64结合并水解两种GR24对映异构体,优先(+)-(2′R)-GR24。体外证明Thr显着增加了ShHTL7受体对MAX2的亲和力。

4、作者发现Var64响应KAR。同时体外证明Thr显着增加了ShHTL7受体对MAX2的亲和力。深入分析Var64化学结构及动力学发现,Var19(TrpLeu和GlyThr包含Var64氨基酸的一个子集),的ShHTL7中氨基酸是MAX2伴侣相互作用的关键,导致对SL敏感。

结论:本文从结构生物学揭示了通过改变三个突变将非独脚金内酯基受体KAI2转变为识别植物激素独脚金内酯的受体。这种经过修饰的受体仍然保留其感知KAI2配体的天然功能。我们的定向进化研究表明,增加KAI2的受体只需要几个关键突变,这可能对寄生植物中独脚金内酯受体的进化产生影响。植物生长发育过程中激素扮演了重要角色。本文中揭示了激素的定向进化,但这种进化是否是植物为了适应后天环境而获得的定向进化。另外其他激素受体是否也存在这种定向进化,从而为了通过不同途径保证激素受体生物活性水平?

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