独脚金内酯(strigolactones,SLs)是近年来植物激素研究的热点之一,在植物分枝和生长发育中具有重要作用。SLs还可以作为根际信号分子,诱导丛枝菌根真菌(AMF)的菌丝分枝以及刺激有害寄生小草的种子萌发。因此,了解植物中SLs的产生机制对农作物的产量形成以及减少寄生植物的危害至关重要。
SLs可以分为典型(canonical)SL和非典型(noncanonical)SL,典型SL包含一个三环内酯(ABC环)和一个由烯醇醚键连接在一起的单环内酯(D环),而非典型的SL具有未封闭的BC环。大多数典型SL的化学结构由4-脱氧邻苯二酚(4DO)和5-脱氧三醇(5DS)的衍生物组成,它们分别具有邻苯二酚型和strigol型SLs的最简单结构。研究表明,SL的生物合成起始于类胡萝卜素异构酶DWARF27(D27)、类胡萝卜素裂解双加氧酶7(CCD7)以及CCD8,将trans-β-类胡萝卜素转化为中间体carlactone(CL)。之后,CL由moreaxillarygrowth1(MAX1)编码的细胞色素P单加氧酶CYPA氧化生成CLA(carlactonoicacid),CLA再经进一步的反应生成SLs,但是目前对SLs合成过程中的CLA的下游途径仍知之甚少。
ProposedbiosynthesispathwayofSLs
近日,日本KobeUniversity的YukihiroSugimoto课题组在ScienceAdvances发表了一篇题为DirectconversionofcarlactonoicacidtoorobancholbycytochromePCYPCinstrigolactonebiosynthesis的研究论文,鉴定了一种新的催化CLA转化为经典SL的细胞色素P单加氧酶。
之前研究表明,外源rac-CLA可被生物转化为邻苯二酚(一种典型SL)和orobanchylacetate,并且在豇豆中这种生物转化被CYP抑制剂抑制,表明细胞色素PCYP参与将CLA向邻苯二酚的转化。该研究首先对豇豆VuMAX1的功能进行了表征,发现重组VuMAX1可以催化CL向CLA的转化,但是不能催化CLA向4DO或邻苯二酚的转化,这表明存在CYPA之外的其他CYP负责将CLA转化为邻苯二酚。
该研究进一步通过在缺Pi营养液(缺Pi导致根分泌物中SL水平升高)中添加rac-GR24(合成的SL),发现SL水平增加(与预期的反馈调节相反),表明SL生物合成基因的上调。该研究进一步通过RNA-seq进行了共表达基因网络分析,从豇豆CCD8(VuCCD8)的转录模块中选择了未表征的CYPC和CYPB作为候选对象。同时,该研究表明VuCYPC和VuCYPB基因与SL生物合成基因共表达,表明这两个基因参与豇豆的SL生物合成。此外,该研究克隆了VuCYPC和VuCYPB并在昆虫细胞表达系统中进行了异源表达,发现重组VuCYPB与rac-CLA孵育未产生邻苯二酚,但是VuCYPC可以。以上综合表明VuCYPC是催化CL转化的潜在基因。
该研究还结合液质联用的结果提出了VuCYPC催化反应的分子机理,即CLA中C-18位置的两步氧化生成18-oxo-CLA,然后通过BC环闭合反应继续产生邻苯二酚立体异构体。该研究还在番茄中通过CRISPR-Cas9技术表征了CYPC的功能,该研究发现,SlCYPC敲除(SlCYPC-KO)的番茄根系分泌物中未检测到邻苯二酚但是有CLA的积累,而野生型的根系分泌物中未发现CLA,这进一步表明CYPC通过催化BC环闭合反应从CLA合成邻苯二酚。
EffectoftargetedmutationinSlCYPC.
总之,该研究鉴定了一种新的邻苯二酚合酶CYPC,该研究还表明对不同植物中CYP家族酶的功能分析对阐明典型SL的生物合成机制具有至关重要的意义。
参考文献B.Zwanenburg,D.Blanco-Ania,Strigolactones:Newplanthormonesinthespotlight.J.Exp.Bot.69,–().K.Yoneyama,X.Xie,K.Yoneyama,T.Kisugi,T.Nomura,Y.Nakatani,K.Akiyama,C.S.P.McErlean,Whicharethemajorplayers,canonicalornon-canonicalstrigolactones?J.Exp.Bot.69,–().Y.Seto,A.Sado,K.Asami,A.Hanada,M.Umehara,K.Akiyama,S.Yamaguchi,Carlactoneisanendogenousbiosyntheticprecursorforstrigolactones.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,–().原文链接:
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